1．復溫從液氮中取出凍存管，立即放入37～40℃水浴中，快速搖晃直至完全融化，應在1分鐘內完成復溫過程。

2．去除凍存液無菌打開凍存管，將細胞凍存液移入無菌的離心管內，加入約5 ml生長液，輕輕搖勻，將細胞懸液經1000r/min離心5分鐘，棄上清液。

3．復蘇培養(yǎng)離心后細胞沉淀用少量生長液懸浮，轉入培養(yǎng)瓶中補齊培養(yǎng)液，即配成所需要的細胞濃度，置37℃,5% CO₂孵箱培養(yǎng)。或無菌操作打開凍存管，將細胞懸液吸到培養(yǎng)瓶中補足生長液后，置37℃ 5% C0₂孵箱中培養(yǎng)，4～6小時后，待細胞貼壁后輕輕倒掉含凍存液的生長液，換生長液后繼續(xù)培養(yǎng)。