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上海滬崢生物科技有限公司
產品展廳
狐貍源性成分(Vulpes)試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:上海滬崢
  • 產地:國內
  • 貨號:HXG732
  • 價格: ¥1380/千克
  • 發布日期: 2021-03-29
  • 更新日期: 2025-09-16
產品詳請
產地 國內
品牌 上海滬崢
貨號 HXG732
用途 僅限科研
包裝規格 50T/盒
純度 詳詢客服%
CAS編號
是否進口

狐貍源性成分(Vulpes)試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢主要產品,其特點靈敏性高 、特異性高,判斷陰陽性結果標準,廠家供貨,品質保證,價格優惠,歡迎來電咨詢!

產品名稱:狐貍源性成分(Vulpes)試劑盒(熒光-PCR法)

英文名稱:Vulpes derived  ingredients Detection Kit(Real-Time PCR Method)
包裝:50T

【預期用途】動物源性成分廣泛分布于食品、飼料、化妝品等,與人們的生活息息相關,其中食品和飼料所占的比例*。肉及肉制品摻假成為世界各國共同關注的熱點問題,肉食品及其飼料的安全隱患直接關系到人類的安危。近幾十年來,以 PCR 技術為核心的動物源性成分檢測獲得了廣泛應用

本試劑盒適用于動物組織以及食品、飼料等樣本中狐貍源性成分的檢測。

【檢驗原理】

本試劑盒采用TaqMan探針法實時熒光PCR技術,設計一對狐貍源性成分基因保守區特異性引物結合一條特異性探針,用熒光PCR技術對狐貍源性成分基因保守區的DNA進行體  外擴增檢測,從而達到快速檢測之目的。

狐貍源性成分(Vulpes)試劑盒(熒光-PCR法)PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。

狐貍源性成分(Vulpes)試劑盒(熒光-PCR法)PCR 管中加入下列成分:

成份

樣品

陽性對照

陰性對照

雙酶一管式 RT-PCR Buffer,

15 uL

15 uL

15 uL

EMCV 專一性引物對

2 uL

2 uL

2 uL

樣品 RNA

1-5 uL

2 uL

EMCV 陽性對照

2 uL

補超純水到

28 uL

28 uL

MMLV-Taq Mix

2 uL

2 uL

2 uL

狐貍源性成分(Vulpes)試劑盒(熒光-PCR法)操作步驟

取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g,手術剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 1.5mL 滅菌離心管中。

DNA 提取

樣本 DNA 的提取采用 DNA 取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。試劑配制(試劑準備區)根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 10 份,多配制 1 ),每測試反應體系配制如下表:

試劑

Duck 反應液

酶液

用量

20μL

1μL

加樣(樣本處理區)將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。


PCR 擴增(核酸擴增區)

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

4.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25ul;熒光通道選擇: 檢測通道

Reporter Dye)FAM, 淬滅通道Quencher Dye)NONE,請勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3 推薦循環參數設置:

步驟

循環數

溫度

時間

收集熒光信號

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

結果分析判定設置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出


現整體傾斜時,根據分析后圖像調節 Baseline start (一般可在 3~15 范圍內調節)、stop (一般可在 5~20 范圍內調節),以及 Threshold Value (上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

判斷a) 檢測通道 Ct ≤30,有 FAM 熒光信號檢出,并出現典型的擴增曲線,判斷樣品為陽性。

b) 30≤35 時,且有典型的擴增曲線時,則需重復實驗。再次擴增后檢測體系的Ct 值仍≤35,且有典型的擴增曲線,則判定該樣品含有相應的動物源性成分。當再次擴增后,檢測體系 Ct 值>35,或無典型的擴增曲線,則判定該樣品不含相應的動物源性成分。

質控標準

a) 空白對照:無FAM 熒光信號檢出或 Ct ≥35,未出現典型的擴增曲線。

b) 陰性對照:無FAM 熒光信號檢出或 Ct ≥35,未出現典型的擴增曲線。

c) 陽性對照:有 FAM 熒光信號檢出,并出現典型的擴增曲線,Ct 值<30。

d) 以上應同時滿足,否則本次實驗無效。

PCR反應液請在冰中配制,然后置于PCR反應儀上進行PCR反應。這種冷啟動法(Cool Start Method)與熱啟動法(Hot Start Method)相結合,更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應,增強PCR擴增的特異性,能得到良好的PCR結果。

PCR的反應條件:

因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。

◇ 循環次數

根據模板DNA的量以及擴增片段的大小,設定25~30個循環。

如果循環次數太少,擴增量不足;如果循環次數太多,則會出現Smear。


狐貍源性成分(Vulpes)試劑盒(熒光-PCR法)特點

1,嚴格的質控體系:所有試劑盒從原料到成品經過嚴格的質控,確保試劑盒質量及穩定性

2,產品不斷優化,很好的靈敏度;

3,綜合指標特性,研發便捷操作的試劑盒;

4,檢測驗證樣本多樣;

5,專業的研發團隊為客戶提供個性化的定*務;

6,提供食品安全藥物殘留Elisa試劑盒,以及快檢試劑盒

7,完善專業的售前售后服務

庫存均有現貨。

4.產品訂購以訂貨當日*價格為準。

5.所有產品為確保質量,出庫均復檢。 Wnt1抗體,信號通路Wnt1抗體 Anti-GLUR3/GRIA 3 PEG3蛋白抗體 小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒 胰島素樣生長因子結合蛋白-4抗體 人羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒 人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒 小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗體 兔子腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 性激素結合球蛋白抗體 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 Anti-Nrf2 Wnt1抗體,信號通路Wnt1抗體 不同類型抗體的保存指南, 用以避免抗體污染或損傷請不時核查數據表以獲取特定保存建議。如果恰當保存和處理, 大多數抗體應能保持活性數月乃至數年。 對于很多抗體而言, 分裝成小等份并凍存于 -20℃ -80℃ 是*保存條件。分裝成小等份可*程度減少由凍融造成的損傷, 以及從單個試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次, 如有剩余, 可將剩余物保存于 4℃。在收到抗體時,在 10,000 × g 下離心20 秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液, 并以小等份轉移至低蛋白結合微量離心管中。小等份的量取決于實驗人員在實驗中通常采用的量。小等份應不小于10μl;等份越小, 儲液濃度因抗體蒸發及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。

公司產品涵蓋ELISA研發、PCR試劑盒,細胞培養,各種生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養基、自產實驗室耗材、小型儀器等。此外、上海滬崢還代理了sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類*公司的產品。




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