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| 產地 | 國內 |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HXG696 |
| 用途 | 僅用科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 是否進口 | 否 |
柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢PCR主要產品之一，產品優(yōu)勢 樣品種類多，質控嚴格，高特異性，供貨快，已被國內外廣大科研工作者使用，被稱謂：質量信得過產品
通用名稱：柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格：50T/盒
英文名稱：CAV-16Detection Kit (Real-Time PCR Method)
自備試劑：樣品 RNA
【檢驗原理】
本試劑盒對柯薩奇病毒CA16型(基因保守區(qū)設計特異性的引物和探針[1-3]，用熒光 PCR 技術對核酸進行體外擴增檢測，從而達到快速檢測之目的。
試劑組成】
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名 稱 |
規(guī) 格 |
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酶液 |
50μL×1 管 |
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CAV-16反應液 |
500μL×2 管 |
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CAV-16陽性質控品 |
50μl ×1 管 |
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陰性質控品 |
250μl×1 管 |
【儲存條件及有效期】
-20℃避光保存、運輸、避免反復凍融，有效期12個月。
【適用儀器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【保存和運輸】
上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過6個月，標本運送應采用0℃冰代。
結果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線；
可疑：檢測通道 35值≤38，建議重復檢測，如果檢測通道仍為 35值≤38， 且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；
陰性：樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。
質控標準
陰性質控品：Ct 值>38 或無 Ct 值；
陽性質控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。
柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)試劑盒(熒光-PCR法)它具有下列特點：1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)馬動脈炎病毒高度保守區(qū)設計，不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產品只能用于科研
7.．不同批號試劑請勿混合使用，在有效期內使用。
運輸及保存： 低溫運輸，2-8℃保存，保存期限為12個月。
1. 取 200μL 處理好的樣本（不足 200μL，可以加入 PBS 緩沖液或者生理鹽水補足 200μL），加入 500μL
裂解液，振蕩 30 秒，室溫靜止 2 分鐘。注：針對 難裂解樣本，室溫靜置時間可延長至5 分鐘。
2. 把上述混合液轉移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質，以免阻塞吸附膜），10000rpm 離心 1 分鐘，棄去套管中液體。
3. 向吸附柱中加入 500μL 去蛋白漂洗液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。
4. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。
5. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。
6. 12000rpm 再次離心 2 分鐘。
7. 把吸附柱轉移至新的 1.5mL 滅菌離心管中，向吸附柱中加入 50μL 洗脫液，并于室溫溫育 2 分鐘。
8.12000rpm 離心 1 分鐘，棄去吸附柱，1.5mL 滅菌離心管中液體即為 DNA/RNA 溶液。提取的 DNA/RNA
可直接用于各種下游應用試驗，如不立即使用，請于-80℃保存。
注意事項
：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。
